利用指示生物的生理生化反應來判斷農藥殘留及其污染情況。例如，可以用實驗室養的敏感性家蠅為測定材料，以其接觸待測樣品后的中毒程度來表示該樣品中的殺蟲劑殘留；以病菌生長受抑制的程度來檢測殺菌劑的殘留，以玉米或其它指示植物根長受抑制的程度來檢測土壤中磺酰脲類除草劑殘留等。該方法無需對樣品前處理比較簡單快速或無需進行前處理，但對指示生物要求較高，測定結果不能確定農藥品種，并且可能出現假陽性或假陰性的情況，該方法可作為快速檢驗方法用于農產品引起中毒或在現場使用。

02 農藥殘留的理化檢測

用于農藥殘留的化學檢測方法有分光光度法、極譜法、原子吸收光譜法、薄層層析法、氣相色譜法、液相色譜法、同位素標記法、核磁共振波譜法、色質聯用法等。自二十世紀九十年代以來，現代化學分析技術日新月異，許多新技術已進入實用階段，如毛細管電脈儀技術（CZE），色質聯用技術（GC-MS、HPLC-MS）超臨界流體色譜技術（SFC），直接光譜分析技術等。這些新技術的應用，大大提高農藥殘留分析的靈敏度，簡化分析步驟，提高了分析效率。但是，這些分析方法有的靈敏度不高，如分光光度法、薄層層析法等。有的需要昂貴的儀器，如色質聯用法、核磁共振波譜法等。還有的需要特殊的設備，如同位素標記法等。因此，目前，普遍采用的還是氣相色譜法和液相色譜法，它們具有簡便、快速、靈敏以及穩定性和重現性好，線性范圍寬、耗資低等優點。

（1）氣相色譜法（GC）

采用氣體作流動相的色譜法，用于揮發性農藥的檢測，具有高選擇性、高分離效能、高靈敏度、快速和特點，是農藥殘留量檢測最常用的方法之一，目前用于農藥殘留檢測的檢測器主要有電子捕獲檢測器（ECD）、微池電子捕獲檢測器（u-ECD）、火焰光度檢測器（FPD）、脈沖火焰光度檢測器（P-FPD）、氮磷檢測器（NPD）等。

（2）液相色譜法（HPLC）

采用液體作流動相的一種色譜法，它可以分離檢測極性強、分子量大及離子型農藥，可用于不易氣化或受熱易分解的農藥的檢測。近年來，采用新型高效固定相、高壓泵和高靈敏度的檢測器，柱前和柱后衍生技術、以及計算機聯用等，大大提高了檢測效率、靈敏度、速度和操作自動化程度。目前用于農藥殘留檢測最多是紫外吸收檢測器（UV）、兩極管陣列檢測器（DAD）和熒光檢測器（FLD）。

（3）色質聯用法（GC-MS，HPLC-MS）

氣相或液相與質譜聯用，它既具備了色譜的高分離效能優點，而且具備了質譜準確鑒定化合物結構的特點，可同時達到定性、定量的檢測目的，特別適合于農藥代謝物、降解物的檢測和多殘留檢測等，不過此法需要貴重儀器且操作繁雜困難，不適合于經常性的檢測。一般可用來做最后的確認工作。

（4）超臨界流體色譜（SFC）

是以超臨界流體作為流動相的色譜體系，超臨界流體是指物質處于臨界溫度和臨界壓力時的狀態，介于氣、液態之間，兼有氣體和液體的某些物理特性，因此，超臨界流體色譜既有氣譜的快速、高效、靈敏的特點，又有能檢測對熱不穩定和大分子化合物的液譜的特點。

（5）毛細管電泳法（CE）

該方法是利用毛細管及高電壓（15-30KW）分離各種農藥殘留物，非常適合于一些難于用傳統色譜法分離的離子化樣品的分離和分析，比HPLC有高10-1000倍的分析能力，而且所需之緩沖液具有不危害環境之特點，在短時間（30分鐘）內就可以完成定性及定量分析。

03 常用農藥殘留的快速檢測方法

（1）酶抑制法：

有機磷與氨基甲酸酯農藥共為神經系統乙酰膽堿脂酶抑制物，因此可以利用農藥靶標酶-乙酰膽用堿酯酶（AChE）受抑制的程度來檢測有機磷和氨基甲酸酯類農藥。該方法目前已開發出了相應的各種速測卡和速測儀。該方法檢測時，蔬菜中的水份、碳水化合物、蛋白質、脂等物質不會對農藥殘留物的檢測造成干擾，不必進行分離去雜，節省了大量預處理時間，從而能達到快速檢測的目的，因此該方法具有快速方便、前處理簡單、無需儀器或儀器相對簡單，適用于現場的定性和半定量測定，目前的農藥殘留快速檢測就是用了該方法，已上升為農業部行業標準。但該方法只能用于測定有機磷和氨基甲酸酯類殺蟲劑，其靈敏度和所使用的酶、顯色反應時間和溫度密切相關，經酶法檢測出陽性后，需用標準儀器檢驗方法進一步檢測，以鑒定殘留農藥品種及準確殘留量。

（2）免疫分析法：

有放射性免疫分析、酶免疫分析、多組份分析物免疫分析、免疫傳感器分析等。最為常用的是酶聯免疫法（ELISA法），它主要是以抗原與抗體的特異性、可逆性結合反應為基礎的農藥殘留檢測方法。該法利用化學物質在動物體內能產生免疫抗體的原理，先將小分子農藥化合物與大分子生物物質結合成大分子，做成抗原，并使之在動物體內產生抗體，對抗體篩選制成試劑盒，通過抗原與抗體之間發生的酶聯免疫反應，依靠比色來確定農藥殘留，它具有專一性強、靈敏度高、快速、操作簡單等優點，試劑盒可廣泛用于現場樣品和大量樣品的快速檢測，可準確定性、定量。但由于受到農藥種類多，抗體制備難度大、在不能肯定樣本中的農藥殘留種類時檢測有一定的盲目性以及抗體依賴國外進口等影響，酶聯免疫法的應用范圍受到較大的限制，目前，我國市場上酶聯免疫法成品試劑盒依賴從國外進口。

（3）化學法—速測靈法

“速測靈”法應用的原理是具有強催化作用的金屬離子催化劑，使各類有機磷農藥（磷酸酯、二硫代酸酯、磷酸胺）在催化作用下水解為磷酸與醇，水解產物與顯色劑反應，使顯色劑的紫紅色退去變成無色。主要針對的是有機磷農藥的殘留檢測，特別是甲胺磷、對硫磷農藥。這種方法采用化學反應原理，避免了通常所使用生化方法（酶法）的缺點（酶的制備、保存以及反應需比較嚴格的條件），靈敏度也達到一定的要求。但是此方法主要針對的是甲胺磷、對硫磷等較高毒性的有機磷農藥殘留的定性檢測。