使用沃特世(Waters®)ACQUITY UPC2™系統(tǒng)成功開(kāi)發(fā)非對(duì)映體超高效合相色譜(UltraPerformance Convergence Chromatography™，UPC2™)方法，用于四種氯菊酯異構(gòu)體的基線(xiàn)分離。

二、背景

公眾對(duì)殺蟲(chóng)劑使用的關(guān)注日益增長(zhǎng)。目前使用的殺蟲(chóng)劑有25%為手性化合物。在這些殺蟲(chóng)劑中，手性在藥效、毒性、代謝特性和環(huán)境方面起著重要的作用。因此，對(duì)立體選擇性分離技術(shù)和分析測(cè)定殺蟲(chóng)劑對(duì)映體純度的需要正在不斷增長(zhǎng)。

氯菊酯是一種合成的化學(xué)品，廣泛用作殺蟲(chóng)劑和驅(qū)蟲(chóng)劑。氯菊酯具有四種立體異構(gòu)體(兩對(duì)對(duì)映體)，由環(huán)丙烷環(huán)上的兩個(gè)手性中心產(chǎn)生，如圖1所示。因此，氯菊酯異構(gòu)體的分離和定量測(cè)定頗具有挑戰(zhàn)性。在分離氯菊酯方面，開(kāi)發(fā)正相HPLC和反相HPLC的方法已經(jīng)做出巨大的努力，但收效不盡如人意。我們?cè)诖苏故荆�利用ACQUITY UPC2，在不足6分鐘之內(nèi)實(shí)現(xiàn)了四種氯菊酯基線(xiàn)分離。

與HPLC方法相比，UPC2™實(shí)現(xiàn)了所有異構(gòu)體的完全基線(xiàn)分離，運(yùn)行時(shí)間大大縮短；對(duì)于殺蟲(chóng)劑的生產(chǎn)廠(chǎng)家而言，進(jìn)行日常非對(duì)映體分析UPC2不愧為理想之選。

三、解決方案

人們已經(jīng)對(duì)各種手性固定相(CSPs)進(jìn)行了評(píng)估，以利用手性正相HPLC和反相HPLC進(jìn)行分離。Lisseter和Hambling報(bào)道了Pirkle型手性固定相用于正相HPLC條件下分離氯菊酯。總的運(yùn)行時(shí)間大于30min，使用的流動(dòng)相為含有0.05%異丙醇的正己烷(Journal of Chromatography，539 1991; 207-10)。但是，順式和反式對(duì)映體拆分并不理想。Shishovska和Trajkovska使用了手性ß-環(huán)糊精手性固定相，用于在反相HPLC條件下拆分氯菊酯，以甲醇和水作為流動(dòng)相(Chirality，22 2010; 527-33)。總的運(yùn)行時(shí)間大于50min，反式氯菊酯對(duì)映體的分離度小于1.5。另外，正相HPLC條件下，CHIRALCEL OJ色譜柱也用于氯菊酯的分離(Chromatographia，60 2004; 523-26)，我們的實(shí)驗(yàn)在表1中所示的條件下進(jìn)行，得到了3個(gè)分開(kāi)的色譜峰，如圖2所示，該結(jié)果與文獻(xiàn)報(bào)道一致。

圖3顯示了利用ACQUITY UPC2系統(tǒng)對(duì)氯菊酯進(jìn)行非對(duì)映體分離。所有四種異構(gòu)體利用更短的OJ-H色譜柱在不足6分鐘內(nèi)實(shí)現(xiàn)了基線(xiàn)分離。實(shí)驗(yàn)結(jié)果總結(jié)于表2中。總的來(lái)說(shuō)，與手性HPLC方法相比，當(dāng)前的UPC2方法實(shí)現(xiàn)了更好的分離，且運(yùn)行時(shí)間更短。

四、總結(jié)

利用沃特世ACQUITY UPC2系統(tǒng)成功分離氯菊酯得到了證明，在小于6分鐘內(nèi)實(shí)現(xiàn)了四種異構(gòu)體的基線(xiàn)分離。與手性HPLC方法相比，UPC2方法具有更高的分離度和更短的運(yùn)行時(shí)間。UPC2方法也杜絕了正相HPLC中有毒正己烷的使用。對(duì)于殺蟲(chóng)劑生產(chǎn)商而言，進(jìn)行日常非對(duì)映體的分析，ACQUITY UPC2系統(tǒng)不愧為理想之選。