栽培銀耳的原料十分廣泛，以棉籽殼最為理想，此外，雜木屑、玉米芯、甘蔗渣等也是常用的原料。常用的培養料配方為：①棉籽殼85%，麥麩13%，石膏粉1.5%，蔗糖0.5%；②棉籽殼80%，麥麩15%，玉米粉3%；石膏粉1%，蔗糖1%；③雜木屑76％、麥麩20％、石膏粉2%、蔗糖1.3%、硫酸鎂0.4%、尿素0.3％。

農戶可以根據自己的實際情況，任選一種配方。配制培養料時，先把木屑、棉籽殼、甘蔗渣等原料進行過篩，剔除混入的沙石、金屬、木塊等物質。然后將棉籽殼或木屑倒入拌料場上，堆成山形，再把麥麩從山尖均勻地往下撒開，并把石膏粉均勻地撒向四周。把上面的干料先攪拌均勻，然后把可溶性的添加物，如蔗糖、硫酸鎂、尿素等溶于水中，再倒入干料中反復攪拌均勻。每100千克干料加水100～130千克，使培養料的含水量在60％左右。檢測的辦法是：手抓培養料握緊，如果手指縫間有水滲出，但不滴下，這時候最為適宜。