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1、關(guān)于分離平板如何分離劃線？
分離平板劃線最好采用分區(qū)劃線的方法，目的是將不同菌分離開(kāi)，便于后續(xù)挑取單菌落鑒定。根據(jù)增菌液濃度決定不同區(qū)之間是否需要燒環(huán)或者更換接種環(huán)，保證菌落不會(huì)過(guò)密集或者過(guò)于稀疏。
2、選擇性分離平板上有的不長(zhǎng)菌，有的有典型菌落，如何判斷？
標(biāo)準(zhǔn)中為了避免漏檢，選用了兩種或兩種以上的選擇性分離平板。由于不同種類的沙門(mén)在平板上生長(zhǎng)有差異，所以某些沙門(mén)氏菌會(huì)出現(xiàn)在某一種平板上生長(zhǎng)，其他平板不生長(zhǎng)或者生長(zhǎng)不典型的情況。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)，任何一種分離平板上出現(xiàn)可疑菌落都需要進(jìn)行后續(xù)的鑒定，不能直接判定。根據(jù)后續(xù)生化和血清結(jié)果再報(bào)告檢出或者未檢出。
3、培養(yǎng)基滅菌前后如何測(cè)定pH？
培養(yǎng)基pH值測(cè)定是完全溶解，滅菌后，冷卻至25℃進(jìn)行測(cè)量。我司不推薦滅菌前測(cè)定，因?yàn)闇缇^(guò)程中，溫度和成分間的化學(xué)反應(yīng)，會(huì)影響pH值。所以，推薦客戶滅菌冷卻后測(cè)量。如果是含瓊脂的培養(yǎng)基可以采用固體電極進(jìn)行測(cè)量。
4、血清學(xué)鑒定時(shí)H血清鑒定使用的半固體瓊脂配置及挑菌問(wèn)題
轉(zhuǎn)接半固體培養(yǎng)后，由于瓊脂含量低、平板軟，所以建議采用一次性接種環(huán)輕輕刮取擴(kuò)散邊緣菌苔進(jìn)行后續(xù)操作。金屬接種環(huán)質(zhì)地堅(jiān)硬容易戳破瓊脂。
5、血清學(xué)鑒定是否需要做分型？
按照標(biāo)準(zhǔn)要求報(bào)告結(jié)果只需報(bào)告檢出或未檢出沙門(mén)氏菌，不需要報(bào)告具體血清型，所以只需要做O多價(jià)和H多價(jià)就可以了。如果需要后續(xù)進(jìn)行分型，需要購(gòu)買(mǎi)群血清及單因子血清。
6、生化鑒定使用的菌懸液濁度要求？
生化鑒定套裝為微量鑒定系統(tǒng)，對(duì)于菌懸液濃度有要求。使用0.5M濁度進(jìn)行接種。菌懸液濃度過(guò)大或者過(guò)小對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確度有影響。
7、鼠傷寒沙門(mén)氏菌接種三糖鐵瓊脂斜面變黑的問(wèn)題？
可能是由于接種量過(guò)大或者培養(yǎng)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致的，建議減少接菌量或縮短培養(yǎng)時(shí)間。
8、BPW在增菌時(shí)必需加熱到44℃嗎？室溫的溫度可以增菌嗎？
培養(yǎng)基預(yù)熱至44℃主要目的是保證乳粉的充分溶解，室溫條件下加入樣品可能會(huì)導(dǎo)致部分樣品聚集成團(tuán)，不易溶解。
10、不同克羅諾桿菌的產(chǎn)黃色素能力不同，并且有文獻(xiàn)報(bào)道約10%的克羅諾菌屬的菌株不具有產(chǎn)黃色素的能力，所以僅根據(jù)產(chǎn)黃色素進(jìn)行判定會(huì)有漏檢的情況，建議結(jié)合生化試驗(yàn)進(jìn)行判斷。在25℃時(shí)更易觀察黃色素的產(chǎn)生，溫度過(guò)高黃色素顏色會(huì)變淡（出自《伯杰氏細(xì)菌手冊(cè)》）。
根據(jù)我們生化干制套裝中提供的0.5麥?zhǔn)蠞岫缺葷峁茏鳛閰⒈龋部梢赃x用濁度儀。
12、為什么用同一株標(biāo)準(zhǔn)菌株 ATCC29544 做陽(yáng)性添加后做阪崎干制時(shí)西蒙氏檸檬酸有陰性也有陽(yáng)性？
如果操作正確，保證菌株活性及純度的情況下，ATCC29544 這株模式菌株的西蒙氏檸檬酸鹽反應(yīng)應(yīng)該呈現(xiàn)陽(yáng)性。
ESM015可以進(jìn)行準(zhǔn)確的篩選，相比較而言ESM016 培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌株特異性更強(qiáng)，結(jié)果更易觀察。
不同過(guò)程的溫度的作用是不一樣的。BPW進(jìn)行36±1℃，主要是為了使得產(chǎn)品中的微生物進(jìn)行復(fù)蘇；選擇性增菌44±0.5℃是為了提高選擇性；TSA 25℃利于黃色素的產(chǎn)生；生化試驗(yàn)30℃是為了提供適宜的溫度更利于目標(biāo)菌的生長(zhǎng)并觀察生化反應(yīng)。
目前我們實(shí)驗(yàn)室的陰溝腸桿菌標(biāo)準(zhǔn)菌株在ESM015上為白色菌落，但是1%的陰溝腸桿菌是具有α-葡萄糖苷酶的活性，所以極少的陰溝腸桿菌也會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)綠色菌落。
根據(jù)限量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行選擇，目前限量標(biāo)準(zhǔn)中要求一段奶粉進(jìn)行定量檢測(cè)。
陰性對(duì)照試驗(yàn)不用全過(guò)程添加，只需在部分生化實(shí)驗(yàn)時(shí)添加陰性對(duì)照菌株。
我公司成品萬(wàn)古霉素已經(jīng)過(guò)過(guò)濾除菌，可直接使用，如果自行配制建議進(jìn)行過(guò)濾除菌。
由于微生物的數(shù)量和分布不均勻?qū)е拢⑸锊荒軓?fù)檢。
21、自立袋的封口不會(huì)造成無(wú)氧環(huán)境，阪崎腸桿菌能夠正常生長(zhǎng)。
培養(yǎng)基高壓前進(jìn)行煮沸即可避免黑色沉淀的產(chǎn)生。
