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分光光度技術(shù)的基本應(yīng)用

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-04-26

 

一、測(cè)定溶液中物質(zhì)的含量

  可見或紫外分光光度法都可用于測(cè)定溶液中物質(zhì)的含量。測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)溶液(濃度已知的溶液)和未知液(濃度待測(cè)定的溶液)的吸光度,進(jìn)行比較,由于所用吸收池的厚度是一樣的。也可以先測(cè)出不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)液的吸光度,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,在選定的濃度范圍內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)曲線應(yīng)該是一條直線,然后測(cè)定出未知液的吸光度,即可從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查到其相對(duì)應(yīng)的濃度。

  含量測(cè)定時(shí)所用波長(zhǎng)通常要選擇被測(cè)物質(zhì)的最大吸收波長(zhǎng),這樣做有兩個(gè)好處:⑴靈敏度大,物質(zhì)在含量上的稍許變化將引起較大的吸光度差異;⑵可以避免其它物質(zhì)的干擾。

二、用紫外光譜鑒定化合物

  使用分光光度計(jì)可以繪制吸收光譜曲線。方法是用各種波長(zhǎng)不同的單色光分別通過某一濃度的溶液,測(cè)定此溶液對(duì)每一種單色光的吸光度,然后以波長(zhǎng)為橫座標(biāo),以吸光度為縱座標(biāo)繪制吸光度──波長(zhǎng)曲線,此曲線即吸收光譜曲線。各種物質(zhì)有它自己一定的吸收光譜曲線,因此用吸收光譜曲線圖可以進(jìn)行物質(zhì)種類的鑒定。當(dāng)一種未知物質(zhì)的吸收光譜曲線和某一已知物質(zhì)的吸收光譜曲線開關(guān)一樣時(shí),則很可能它們是同一物質(zhì)。一定物質(zhì)在不同濃度時(shí),其吸收光譜曲線中,峰值的大小不同,但形狀相似,即吸收高峰和低峰的波長(zhǎng)是一定不變的。紫外線吸收是由不飽和的結(jié)構(gòu)造成的,含有雙鍵的化合物表現(xiàn)出吸收峰。紫外吸收光譜比較簡(jiǎn)單,同一種物質(zhì)的紫外吸收光譜應(yīng)完全一致,但具有相同吸收光譜的化合物其結(jié)構(gòu)不一定相同。除了特殊情況外,單獨(dú)依靠紫外吸收光譜決定一個(gè)未知物結(jié)構(gòu),必須與其它方法配合。紫外吸收光譜分析主要用于已知物質(zhì)的定量分析和純度分析。

 
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