配制試劑溶液：用蒸餾水把試劑配成0.25-0.5%的溶液，將溶液儲存在黑暗條件下或棕色瓶中。

去除水稻穎殼：將水稻樣品放入出糙機中進行出糙，出糙后清除稻粒中的穎殼，然后隨機取出種子試樣2份，每份100粒。

巧切米粒種胚：用左拇指、食指捏緊米粒，露出胚部，右手拇、食、中指捏緊單面刀片，沿著米粒種胚輕輕斜削，即可將米粒種胚剖開。

放入試液浸種：將胚切好后的米粒放入培養皿中，倒入配制的四氮唑溶液，液面以剛好淹沒米粒為佳，避光，放到30℃的溫度下浸漬15分鐘。

測算發芽率：凡種胚染成紅色的種子為有生活力的種子，芽鞘、根鞘、胚根尖端、盾片上、下端不染色，其余部分染色的也是有生活力的種子。種胚全部不染色或染成淺紅色或盾片中部、胚根、胚軸、胚芽等其中之一不染色的為無生活力的種子，然后根據鑒別的結果算出生活力的百分率。生活力的百分率要高于自然發芽率的百分率的8-10%，也就是說，在一般情況下生活力的百分率減去8-10個百分點，即為田間自然發芽率的百分率。

用四氮唑測定水稻發芽率具有經濟、省力、快速、準確的特點。但須注意，四氮唑具有較強的感光性，有毒，因此必須避光保存，處理后的種子不能作飼料，試驗完畢后應洗手。