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菌落總數的常見問題(一些新手問的問題)

放大字體  縮小字體 發布日期:2023-12-26
核心提示: 1.有新人可能會拿著菌落總數的平板去問別人這是什么菌?答:這是看不出來的,菌落總數只能檢測出樣品衛生情況,一個樣品的
 1.有新人可能會拿著菌落總數的平板去問別人這是什么菌?

答:這是看不出來的,菌落總數只能檢測出樣品衛生情況,一個樣品的細菌數量,不能驗證出什么菌。這是一個不應該犯的誤區。

 

2.若所有稀釋度的平板菌落數均不在 30CFU~300CFU 之間,其中一部分小于 30CFU 或大于300CFU 時。就會有人不知道怎么去判定那個梯度更接近30-300。

舉例:一個梯度:28/28;另梯度:305/305,那么那個數據更接近呢?

兩個方法(網友提供):

a、按標準字面意思直接做差比較后再乘以稀釋倍數:28-30=-2,他們相差2;305-300=5,他們相差5。2比5要小,那么采取28相應的梯度再乘以稀釋倍數;

b、恢復為同稀釋度做差比較:把兩個梯度換算成同一個梯度,一般把28換算成280。280-300=-20,相差20;305-300=5,相差5。20比5要大,那么采取305相應的梯度。

(個人意見:我是更偏向于第二種,因為要在同一個梯度上做比較才能體現出數據的可靠性,同時我偏向采用前一個梯度的數字,那么這個數值可以減少一步步驟帶來的誤差,數據可能更加接近樣品的情況)

 

3.有時候會出現這么一個情況,最低稀釋梯度中一個平板出現1個菌落,另一個無菌落生長。那么結果怎么出呢?

答:(以固態為例子)在過去也有討論過,有人認為報告寫5,也有認為報告寫<10(比較兩個平板均無菌落生長的時候報<10)這個兩個報告方法其實也是可以采用。(我是采用第一種;個人理解不長報告<10,那么長了也報<10嗎?不太合理)

 

4.在做菌落總數的時候,有時候會樣品和菌落分不清的(老前輩不會這樣),那么如何區分兩種物質呢?

答:在培養基中添加TTC(一般2%濃度1mL加到400mL的培養基中,TTC的濃度不要過高,會有抑制作用)。TTC的原理:TTC和活細胞線粒體內的琥珀酸脫氫酶反應,生成紅色的甲月贊。那么生長的菌落會變成紅色,這樣就可以區分菌落與樣品。

 

還有一個方法:4℃冷藏保存一個樣品和培養基混勻的平板做對照,觀察菌落的形態特征,老前輩們基本靠這個去區分的。

 

5、菌落總數計數包括霉菌嗎?

答:菌落總數的概念是這么規定的,食品檢樣經過處理,在一定條件下(如培養基、培養溫度、培養時間等)培養后,所得每g(mL)檢樣中形成的微生物菌落總數。所以也包括在PCA上生長的霉菌和酵母等微生物。

 

6、培養基溫度不好控制?

答:前提是培養基滅菌好了放在48 ℃士2℃的水浴鍋內保溫。使用時一個同事在外面把培養基從水浴鍋拿到傳遞窗,培養基表面噴酒精殺菌,然后開啟傳遞窗的紫外燈5min(這一步是對培養基表面殺菌,減少對潔凈房的污染)。里面的同事5min之后拿起來放在手心人體不覺燙手,這樣的溫度最佳倒平板。(注意:倒平板的速度要快,一次最好只拿一瓶,避免培養基凝固)

 

7、有些朋友不理解菌落總數的單位CFU的意思。

答:CFU為Colony-Forming Units英文縮寫,其含義是形成菌落的菌落個數,不等于細菌個數。(比如兩個相同的細菌靠得很近或貼在一起,那么經過培養這兩個細菌將會形成一個菌落,此時就是2個細菌,1CFU)。菌落總數往往采用的是平板計數法,經過培養后我們數出平板上所生長出的菌落個數,從而計算出每毫升或每克待檢樣品中可以培養出多少個菌落,于是以CFU/ml或CFU/g報告之。

 

8、菌落超標的危害。

答:食品的菌落總數嚴重超標,說明其產品的衛生狀況達不到基本的衛生要求,將會破壞食品的營養成分,加速食品的腐敗變質,使食品失去食用價值。消費者食用微生物超標嚴重的食品,很容易患痢疾等腸道疾病,可能引起嘔吐、腹瀉等癥狀,危害人體健康安全。

但需要強調的是,菌落總數和致病菌有本質區別,菌落總數包括致病菌和有益菌,對人體有損害的主要是其中的致病菌,這些病菌會破壞腸道里正常的菌落環境,一部分可能在腸道被殺滅,一部分會留在身體里引起腹瀉、損傷肝臟等身體器官,而有益菌包括酸奶中常被提起的乳酸菌等。但菌落總數超標也意味著致病菌超標的機會增大,增加危害人體健康的幾率。

 

9、培養后的培養基出現干裂情況。

答:干裂是由于培養基里面的水份缺失導致,所以當出現干裂情況,先要觀察干裂平板的數量和位置。看是否是培養箱內部溫度不穩定導致(一般平皿一疊可以放置六個,同時要注意每疊之間需要保留一點間隙讓其通風);排除儀器的原因之后,看是培養基否倒得太薄(初學者可以拿三角瓶裝水進行練習);還有其他原因,其實在出現干裂的情況下,結果是無效的(除非干裂情況不嚴重)。排查出問題所在,可以避免我們下次再犯錯。

 

10、培養基的配置。

答:培養基的包裝上(標準上)都會寫著先煮熱溶解再分裝,那么是不是一定要煮熱溶解呢?首先瓶子上的配置方法是直接配置一升的PCA,這里是必須要煮熱溶解(防止不均勻,使得部分培養基不凝固)。

其實配置培養基有兩個方法:第一個:用一個大容器配置培養基,然后加水煮熱溶解(注意攪拌,防止燒焦),待溶解完成之后進行分裝(這里需要注意安全),再去滅菌。第二個方法就是使用500mL三角瓶(其他容器也可以)配置300ml的培養基,加水稍微溶解(此步不需要加熱),再拿去滅菌。

編輯:songjiajie2010

 
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