（一）、浸泡

    新瓶使用前應先用自來水簡單刷洗，然后用稀鹽酸溶液（5%）浸泡過夜；培養后的玻璃器皿用后要立即浸入清水中；注意：讓水能完全進入瓶皿中，不應留有氣泡。

   （二）、刷洗

浸泡后的玻璃器皿用毛刷沾洗滌劑洗滌（宜選用軟毛刷和優質的洗滌劑，如高級洗衣粉或洗潔精），絕對不能使用含沙粒的去污粉！洗刷時特別注意洗刷瓶角部位。

   （三）、浸泡

器皿要充滿清潔液，勿留氣泡。浸泡時間不應少于6小時；一般應浸泡過夜。

清洗液配方：

【強液】    重鉻酸鉀                   63g

            濃硫酸                    1000ml

            蒸餾水                     200L

【次強液】  重鉻酸鉀                   120g

            濃硫酸                     200ml

            蒸餾水                     1000ml

【弱液】    重鉻酸鉀                   100g

            濃硫酸                     100ml

            蒸餾水                     100ml

矽酸鈉洗液；

使用比較安全，可以代替清洗液，但價格較貴。

先配制成100Χ貯存液：矽酸鉀80g，偏磷酸鈉9g，加熱溶解在1000ml蒸餾水中。使用時，用蒸餾水100倍稀釋。

   （四）、沖洗

刷洗和浸酸后都必須用水充分沖洗，使之不留任何殘跡。沖洗宜用洗滌裝置，以保證沖洗效果，如用手工操作，每瓶都得用水灌滿，倒掉，重復十次以上，最后再用蒸餾水漂洗2～3次，涼干備用。

    二、膠塞的清洗

    新購置的膠塞先用自來水沖洗干凈后，再做常規處理。

常規洗滌方法：

浸泡

↓

2%NaOH煮沸（10～20分鐘）

↓

自來水沖洗

↓

1%稀鹽酸浸泡（30分鐘）

↓

自來水沖洗

↓

蒸餾水清洗（2～3次）

↓

涼干備用

 

    三、塑料器皿的清洗

目前我國培養使用的塑料器皿主要是從國外購置的，是一種無毒并已經消毒過滅菌密封包裝的商品。用時，只要打開包裝即可，是一次使用性物品。必要時，用后經無菌處理后 ，尚可反復使用2～3次，但不宜過多。再用時仍然需要清洗和滅菌處理。塑料器皿質地軟，不宜用毛刷刷洗，造成清洗困難。為此使用中一是防止劃痕，二是用后要立即浸入水中，嚴防附著物干結；如殘留有附著物，可用脫脂棉清拭掉，用流水沖洗干凈，涼干、再用2%NaOH液浸泡過夜，用自來水充分沖洗，然后 用5%鹽酸溶液浸泡30分鐘，最后用自來水沖洗和蒸餾水漂洗干凈，涼干后備用。

 

紫外線直接照射法很方便，效果好，是目前各實驗室常用的消毒法。

【適用范圍】空氣、操作臺表面和一些不能使用其它方法進行消毒的培養器皿（如塑料培養皿、培養板等）

【要求】（1）培養室的紫外線燈應距地面2.5米，使每平方厘米有0.06微瓦能量的照射，才能發生有效的消毒作用。（2）由于各種細菌對紫外線的敏感性不同，所用照射時間和劑量也不同。

【缺點】（1）產生臭氧，污染空氣，對身體有害；（2）射線照射不到的部位起不到消毒作用，故消毒時，物品不宜相互遮擋。

【注意】  有人習慣于邊照射邊進行實驗操作，這樣不好，一是紫外線對細胞、試劑和培養液都有不良影響，二是對人體皮膚也有傷害。

二、濕熱消毒

       濕熱消毒即高壓蒸汽消毒，是最有效的一種方法。

       【適用范圍】布類、膠塞、金屬器械、玻璃器皿及某些培養用液。

       【要求】

              培養用液、橡膠制品                 10磅10分鐘

              布類、玻璃制品、金屬器械等         15磅20分鐘

三、濾過消毒

   【適用范圍】  大多數培養用液，如人工合成培養液、血清、酶溶液等（這些在高溫下會發生變性，失去其功能，必須采用濾過法除菌。

   【常用濾器】  Zeiss濾器、微孔濾膜濾器及各種不同規格的一次性濾器。常用孔徑0.22um濾膜過濾一般用液即可。

   【注意】

        （1）濾膜用后丟棄，濾器清洗也比較方便，先用毛刷蘸洗滌劑刷洗干凈，用自來水沖洗后，再用蒸餾水沖洗，涼干即可；

        （2）用前再裝上一張新的濾膜；

        （3）消毒時旋鈕不要扭太緊，凡與空氣接觸部位都用紙包裝好，以保證消毒時的效果；

        （4）消毒后，在無菌環境中立即將旋鈕扭緊；

        （5）濾過少量液體時，用一種能安裝在注射器上的小濾器，使用相同的濾膜，濾過時把濾過物裝入注射器針管內，壓出過濾物注入無菌容器中即。