本實(shí)驗(yàn)通過為期90天的生長(zhǎng)試驗(yàn)評(píng)估不同飼料蛋白和脂肪水平對(duì)草魚幼魚生長(zhǎng)、飼料利用和全魚生化組成的影響。配制了六組實(shí)用飼料，包括2種不同可消化蛋白水平（P1:33%和P2:37%）和3種不同脂肪水平（L1:4%、L2:6%和L3:8%）。每天投喂3次，均為飽食投喂。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：投喂不同飼料組的草魚增重率（387-594%）、特定生長(zhǎng)率（1.7-2.1%）、攝食量（46.1-51.4g/尾魚）、飼料系數(shù)（1.2-1.7）、蛋白質(zhì)效率（1.6-2.4）、肝體比（3-3.2%）、蛋白消化率（87.4-93.5%）、脂肪消化率（91.1-97.6%）和能量消化率（87.6-93.5%）以及全魚脂肪含量（16.6-18.6%）均有顯著差異。P1L2組的草魚生長(zhǎng)性能、飼料系數(shù)、蛋白質(zhì)效率、攝食量、蛋白、脂肪和能量消化率都顯著高于其它各組（P<0.05）。這些結(jié)果表明P1L2組飼料更適于草魚的生長(zhǎng)。當(dāng)脂肪水平提高到6%時(shí)，由于脂肪對(duì)蛋白具有節(jié)約作用而使蛋白利用率明顯提高。根據(jù)這些結(jié)果可得到如下結(jié)論：草魚幼魚實(shí)用飼料的營(yíng)養(yǎng)水平達(dá)到33%的可消化蛋白、6%的脂肪和10.7 kJ/g的消化能時(shí)更適于其生長(zhǎng)和飼料利用。 

前言

    眾所周知，相對(duì)于脂肪和碳水化合物，魚類優(yōu)先利用蛋白質(zhì)供能。但是，無論從營(yíng)養(yǎng)、環(huán)境還是經(jīng)濟(jì)的角度，都應(yīng)該提高飼料蛋白質(zhì)在機(jī)體的保留率，降低其作為能量消耗。Sargent et al.（1999）研究表明，增加飼料脂肪水平在一定程度上可以提高飼料利用率。 

    據(jù)報(bào)道，飼料中的脂肪具有蛋白節(jié)約效應(yīng)，減少蛋白質(zhì)作為能量消耗（NRC, 1992; Vargara et al., 1996），從而減少有機(jī)物和氮排放（Du et al., 2005）。然而也有學(xué)者發(fā)現(xiàn)，這種蛋白節(jié)約效應(yīng)在有些魚類中并不存在（Danielssen and Hjertnes, 1993）。目前在三文魚養(yǎng)殖中，高脂飼料是被普遍使用的。然而也有研究表明，在某些魚類中，多余的飼料脂肪會(huì)對(duì)生長(zhǎng)起負(fù)面作用并降低攝食量和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率，導(dǎo)致脂肪在內(nèi)臟和魚體中積累（Shiau and Huang, 1990）。飼料中的脂肪過多不僅會(huì)抑制魚類脂肪的合成，而且會(huì)降低魚類消化和吸收脂肪的能力（Sargent et al., 1999）。因此，為了獲得最大生長(zhǎng)和最佳的飼料系數(shù)，合理的可消化蛋白和可消化脂肪的比值有很有必要的（Takeuchi et al., 1978）。

    草魚是典型的草食性無胃魚，在自然環(huán)境中主要攝食水草。在水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中，草魚具有很長(zhǎng)的養(yǎng)殖歷史，是中國(guó)內(nèi)陸淡水養(yǎng)殖中最主要的養(yǎng)殖品種之一。雖然草魚的營(yíng)養(yǎng)學(xué)研究從20世紀(jì)70年代就開始了（Dabrowski, 1977; Law, 1986; Cai et al., 2005），但關(guān)于其幼魚最佳的蛋白和脂肪需求水平的報(bào)道卻一直不多。只在蛋白質(zhì)（Dabrowski, 1977）、脂肪（Du et al., 2005）和能量（Carter and Brafield, 1991; Cui et al., 1992）營(yíng)養(yǎng)學(xué)方面有過研究。為了使草魚在水產(chǎn)養(yǎng)殖過程中達(dá)到最佳的生長(zhǎng)速度，確定其蛋白質(zhì)和脂肪的需求量十分必要。考慮到有鰭魚類飼料的蛋白質(zhì)部分通常占最大的成本，我們把目標(biāo)定為在達(dá)到最大的生長(zhǎng)和存活率的同時(shí)降低蛋白水平。

    本實(shí)驗(yàn)研究了飼料蛋白和脂肪水平對(duì)草魚生長(zhǎng)、飼料利用、體組成、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和能量消化率的影響，并推薦了適宜的草魚蛋白和脂肪需求量。

材料與方法

    該實(shí)驗(yàn)在土耳其埃拉擇省的菲拉特大學(xué)的魚類營(yíng)養(yǎng)研究室進(jìn)行。本實(shí)驗(yàn)共配制了六組飼料，設(shè)兩個(gè)可消化蛋白水平（P1：33%和P2：37%），在每個(gè)蛋白水平下分別設(shè)三個(gè)脂肪水平（L1：4%，L2：6%和L3：8%）（表1）。飼料原料購于本地飼料廠（土耳其埃拉擇省Oz Uger飼料企業(yè)），氧化鉻（標(biāo)記物質(zhì)）購自Merck公司，維生素和礦物質(zhì)預(yù)混料來自Roche 公司。所有飼料原料先經(jīng)過粉碎達(dá)到500 µm的細(xì)度，之后加蒸餾水進(jìn)行機(jī)械混合，再經(jīng)手工制粒成3 mm粒徑的顆粒料，在70℃下經(jīng)過12小時(shí)烘干后，放置于聚乙烯袋中，保存在4℃環(huán)境下直至使用（Cai et al., 2005）。

    每組飼料隨機(jī)分配三個(gè)圓錐形水族箱（50L），每個(gè)水族箱放養(yǎng)30尾草魚幼魚，平均體重為7.1±0.1g。每天從09:00到18:00飽食投喂三次，每次間隔為4小時(shí)，為期90天。實(shí)驗(yàn)期間采用自然光照。水族箱采用淡水流水系統(tǒng)，水流速度為250ml/min，水溫為26±2℃,溶氧7.0±0.4mg/L，pH值為7.2±0.2。

    在實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，所有魚均被稱重并計(jì)算每箱的平均體重。在收集糞便前，先投喂實(shí)驗(yàn)飼料7天進(jìn)行馴化。開始收集糞便時(shí)，先在投喂后一小時(shí)把所有箱中存在的殘餌和糞便吸除，在此之后和下一次投喂前的時(shí)間段里以虹吸法收集糞便。在此期間，為了盡量減少糞便營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的損失，每個(gè)缸至少要虹吸兩次。糞便樣品經(jīng)濾紙過濾后，在105℃下干燥12小時(shí)。每個(gè)箱收集的糞便均獨(dú)立檢測(cè)營(yíng)養(yǎng)素和能量消化率（Windell et al., 1978）。

    全魚在粉碎均勻后進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)組成的檢測(cè)。干物質(zhì)、蛋白、脂肪、纖維和灰分都采用標(biāo)準(zhǔn)方法檢測(cè)（AOAC, 2000）。實(shí)驗(yàn)飼料和糞便樣品的氧化鉻成分通過酸水解測(cè)定（Furukawa and Tsukahara, 1966）。干物質(zhì)在65℃下烘24小時(shí)測(cè)定，粗蛋白（%N×6.25）由凱式定氮法測(cè)定，脂肪由索式抽提法測(cè)定，無氮浸出物（NFE）由100減去蛋白、脂肪、灰分和纖維計(jì)算得到，總能由絕熱能量計(jì)測(cè)定。

    對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組的表現(xiàn)消化率根據(jù)cho和slinger（1979）的公式計(jì)算。

      ADC%=100×[1-（F/D）×（Fi/Di）]

    以上公式中ADC%表示表觀消化率，F表示糞便的營(yíng)養(yǎng)素或能量含量，D表示飼料的營(yíng)養(yǎng)素或能量含量，Di表示飼料中的鉻含量，Fi表示糞便的鉻含量。

    數(shù)據(jù)為平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤，數(shù)據(jù)分析采用方差分析法(ANOVA)，用Duncan’s 多重比較對(duì)均值進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn)，當(dāng)P<0.05時(shí)為顯著性差異。對(duì)飼料和全魚的脂肪含量進(jìn)行相關(guān)性分析。所采用的軟件為SPSS 10.1。

結(jié)果

    實(shí)驗(yàn)期間草魚幼魚均能正常攝食各組實(shí)驗(yàn)飼料，所有組別的存活率均為100%，也沒有出現(xiàn)體表病理狀況。各組的特定生長(zhǎng)率（SGR）數(shù)據(jù)表明每天的體重增加平均高于1.7%。P1L1組的增重率（387%）和SGR（1.7%）都顯著低于其它組別。但是，在可消化蛋白為33%的組中，當(dāng)飼料脂肪水平升高時(shí)，增重率和SGR都顯著增加。飼料系數(shù)（FCR）在1.7-1.2之間，其中P1L2組（33%可消化蛋白、6%脂肪和10.7KJ/g消化能）的FCR顯著低于其它各組（P<0.05）。蛋白質(zhì)效率（PER）與FCR的趨勢(shì)相反（表2）。

    攝食不同組別飼料的全魚蛋白、纖維、灰分或總能水平均沒有顯著差異（表3）。但在飼料脂肪水平由4%升高到8%時(shí)，全魚脂肪水平顯著增加（P<0.05）。全魚脂肪水平與飼料脂肪含量呈現(xiàn)極顯著正相關(guān)性（R=0.926,P<0.01）。

    表4顯示，P1L2組的蛋白、脂肪和能量消化率最高，P2L3組最低（P<0.05）。但是，不同實(shí)驗(yàn)組的干物質(zhì)、纖維、灰分和無氮浸出物（NFE）消化率沒有顯著差異（表4）。

討論 

    之前的研究表明：草魚幼魚飼料的粗蛋白適宜水平在35-43%（Dabrowski,1977; Du et al., 2005）。本實(shí)驗(yàn)中各飼料組的粗蛋白水平在35%到40%（可消化蛋白水平在33%到37%），在上述范圍內(nèi)。

    各組草魚的平均SGR水平很高（>1.7%）。將飼料脂肪水平由4%提高到6%可使可消化蛋白水平由37%（P2L1組）降低到33%（P1L2組），并且不影響SGR和FCR。同樣，在蛋白水平為33%的各飼料組中，脂肪水平的增加可提高生長(zhǎng)性能和飼料利用率，這表明飼料蛋白已充分用于生長(zhǎng)而非能量消耗，可見，脂肪提供的能量節(jié)約了蛋白。本實(shí)驗(yàn)中草魚的PER數(shù)據(jù)可以支持這種說法，因?yàn)?/span>PER隨著飼料脂肪水平的升高而呈現(xiàn)出升高的趨勢(shì)；在33%蛋白不同能量水平的各組中，該現(xiàn)象更為顯著。

    脂肪的節(jié)約蛋白作用在許多淡水魚和海水肉食性硬骨魚類中都得到了證實(shí)（Vergara et al., 1996）。因脂肪節(jié)約蛋白作用而使魚類生長(zhǎng)顯著提高，在金頭海鯛（Vergara et al., 1996）、虹鱒（Takuechi et al., 1978）中已有報(bào)道。然而也有研究表明在大鯪鲆幼魚（Danielssen and Hjertnes, 1993）和草魚（Du et al., 2005）中體增重與飼料脂肪水平無關(guān)。Peres和Oliva-Teles (1999)認(rèn)為這種蛋白節(jié)約效應(yīng)的缺乏可能與飼料高蛋白水平有關(guān)，根據(jù)Dias et al. (1998)的研究，海鱸飼料脂肪由10%增加到18%時(shí)，只有低蛋白時(shí)才能出現(xiàn)蛋白節(jié)約效應(yīng)。同樣，本實(shí)驗(yàn)中只有在飼料蛋白水平相對(duì)較低（33%）情況下，蛋白利用率才隨脂肪的增加而增加；而且在最適脂肪水平（6%）下，蛋白節(jié)約效應(yīng)最佳。

    全魚體組成表明，飼料脂肪水平與魚體脂肪含量呈正相關(guān)，這與其它許多魚類中的研究結(jié)果都類似（Vergara et al., 1996）。草魚的體脂肪隨飼料脂肪的升高而升高，說明其在體內(nèi)中儲(chǔ)存了脂肪。該結(jié)果在金頭海鯛（Vergara et al., 1996）和草魚（Du et al., 2005）之前的研究中也有發(fā)現(xiàn)。因此，對(duì)許多魚類而言，要增加飼料的脂肪含量都需要謹(jǐn)慎考慮，因?yàn)楹苋菀讓?dǎo)致魚體脂肪沉積。

    本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)P1L1、P1L2和P2L1組的草魚蛋白消化率（93-93.5%）高于Law（1986）投喂38%蛋白的商品飼料的草魚消化率水平（90%）。但是，所有組別的脂肪（91.1-97.6%）和能量（87.6-93.5%）消化率都低于Law（1986）的結(jié)果（脂肪100%和能量98%）。本實(shí)驗(yàn)中，當(dāng)飼料脂肪水平提高到8%時(shí)，蛋白、脂肪和能量消化率都顯著降低，這很可能是生長(zhǎng)性能降低的原因之一。然而，Hernandez et al. (2001)研究表明當(dāng)尖吻鯛（Diplodus puntazzo）飼料脂肪水平升高時(shí)，蛋白的消化率并沒有降低，反而脂肪的消化率提高了。因此，對(duì)于不同魚類而言，攝食高脂飼料對(duì)蛋白和脂肪的消化率的影響可能因品種不同而不同。

結(jié)論

    總而言之，P1L2組生長(zhǎng)性能最大，飼料攝入量、FCR、PER、蛋白消化率、脂肪消化率和能量消化率最高。這些結(jié)果表明P1L2組似乎更適于草魚的生長(zhǎng)。然而，含37%可消化蛋白的高脂飼料（P2L3組）反而會(huì)對(duì)草魚的生長(zhǎng)性能和蛋白消化率產(chǎn)生負(fù)面影響。而且，在低蛋白飼料中脂肪對(duì)蛋白的節(jié)約效應(yīng)是有上限的。33%的可消化蛋白、6%的脂肪和10.7KJ/g的可消化能應(yīng)該是配制草魚幼魚商品飼料的適宜水平。