不同的微生物可對各種糖類、醇類、糖昔類等進行分解，但其分解能力和分解產物均因不同的微生物而不同(見表)。如大腸桿茵能分解乳糖和葡萄糖，而沙門氏茵只能分解葡萄糖，不能分解乳糖。大腸桿菌有甲酸解氫酶，能將分解糖所生成的甲酸進一步分解成二氧化碳和氫氣．故產酸又產氣，而沙門氏茵無甲酸解氫酶，分解葡萄糖僅產酸而不產氣。在進行大腸茵群測定時，就是根據這一原理而采用乳糖發酵試驗。當大腸茵群分解乳糖而產酸時，可使培養基內的溴甲酚紫指示劑由藍色變成黃色，產生的氣體可在倒置的小管內觀察，
表 常用于糖發酵試驗的糖類、醇類和糖苷類

試驗方法：以無菌操作，用接種針或環移取純培養物少許，接種于發酵液體培養基管中，若為半固體培養基，則用接種針作穿刺接種。接種后，置 36±1.0°C培養，每天觀察結果，檢視培養基顏色有無改變（產酸），小倒管中有無氣泡，微小氣泡亦為產氣陽性，若為半固體培養基，則檢視沿穿刺線和管壁及管底有無微小氣泡，有時還可看出接種菌有無動力，若有動力，培養物可呈彌散生長。本試驗主要是檢查細菌對各種糖、醇和糖苷等的發酵能力，從而進行各種細菌的鑒別，因而每次試驗，常需同時接種多管。一般常用的指示劑為酚紅、溴甲酚紫，溴百里藍和An-drade指示劑。