利用物理因子殺滅微生物的方法。包括熱力消毒滅菌、輻射消毒、空氣凈化、超聲波消毒和微波消毒等。

1．熱力消毒滅菌

高溫能使微生物的蛋白質和酶變性或凝固（結構改變導致功能喪失），新陳代謝受到障礙而死亡，從而達到消毒與滅菌的目的。在消毒中，熱可分為濕熱與干熱兩大類。

2．干熱消毒滅菌

干熱是指相對濕度在20％以下的高熱。干熱消毒滅菌是由空氣導熱，傳熱效果較慢。一般繁殖體在干熱80-100℃中經1小時可以殺死，芽胞需160-170℃經2小時方可殺死。

（1）燃燒法。是一種簡單、迅速、徹底的滅菌方法，因對物品的破壞性大，故應用范圍有限。

燒灼法：一些耐高溫的器械（金屬、搪瓷類），在急用或無條件用其他方法消毒時可采用此法。將器械放在火焰上燒灼1-2分鐘。若為搪瓷容器，可倒少量95％乙醇，慢慢轉動容器，使乙醇分布均勻，點火燃燒至熄滅約1-2分鐘。采集作細菌培養的標本時，在留取標本前后（即啟蓋后，閉蓋前）都應將試管（瓶）口和蓋子置于火焰上燒灼，來回旋轉2-3次。

燃燒時要注意安全，須遠離易燃易爆物品，如氧氣、汽油、乙醚等。燃燒過程不得添加乙醇，以免引起火焰上竄而致灼傷或火災。銳利刀剪為保護刀鋒，不宜用燃燒滅菌法。

焚燒：某些特殊感染，如破傷風、氣性壞疽、綠膿桿菌感染的敷料，以及其它已污染且無保留價值的物品，如污紙、垃圾等，應放入焚燒爐內焚燒，使之炭化。

（2）干烤法

 電熱培養箱：利用培養箱的熱空氣消毒滅菌。培養箱通電加熱后的空氣在一定空間不斷對流，產生均一效應的熱空氣直接穿透物體。一般繁殖體在干熱80-100℃中經1小時可以殺死，芽胞、病毒需160-170℃經2小時方可殺死。熱空氣消毒滅菌法適用于玻璃器皿、瓷器以及明膠海棉、液體石臘、各種粉劑等。滅菌后待箱內溫度降至50-40℃以下才能開啟柜門，以防炸裂。

微波消毒：微波是一種高頻電磁波，其殺菌的作用原理，一為熱效應，所及之處產生分子內部劇烈運動，使物體里外濕度迅速升高；一為綜合效應，諸如化學效應、電磁共振效應和場致力效應。目前已廣泛應用于食品、藥品的消毒，用微波滅菌手術器械包、微生物實驗室用品等亦有報告。若物品先經1％過氧乙酸或0.5％新潔爾滅濕化處理后，可起協同殺菌作用，照射2分鐘，可使殺芽胞率由98.81％增加到99.98％-99.99％。  

微波對人體有一定危害性，其熱效應可損傷睪丸、眼睛晶狀體等，長時間照射還可致神經功能紊亂。使用時可設置不透微波的金屬屏障或戴特制防護眼鏡等。

3．濕熱消毒滅菌

濕熱消毒滅菌是由空氣和水蒸氣導熱，傳熱快，穿透力強，濕熱滅菌法比干熱滅菌法所需溫度低、時間短。

（1）煮沸法。將水煮沸至100℃，保持5-10分鐘可殺滅繁殖體，保持1-3小時可殺滅芽胞。在水中加入碳酸氫鈉至1％-2％濃度時，沸點可達105℃，能增強殺菌作用，還可去污防銹。在高原地區氣壓低、沸點低的情況下，要延長消毒時間（海拔每增高300m，需延長消毒時間2分鐘）。此法適用于不怕潮濕耐高溫的搪瓷、金屬、玻璃、橡膠類物品。

煮沸前物品涮洗干凈，打開軸節或蓋子，將其全部浸入水中。大小相同的碗、盆等均不能重疊，以確保物品各面與水接觸。銳利、細小、易損物品用紗布包裹，以免撞擊或散落。玻璃、搪瓷類放入冷水或溫水中煮；金屬、橡膠類則待水沸后放入。消毒時間均從水沸后開始計時。若中途再加入物品，則重新計時，消毒后及時取出物品，保持其無菌狀態。

（2）高壓蒸汽滅菌法。高壓蒸汽滅菌器裝置嚴密，輸入蒸汽不外逸，溫度隨蒸汽壓力增高而升高，當壓力增至103-206kPa時，濕度可達121.3-132℃。高壓蒸汽滅菌法就是利用高壓和高熱釋放的潛熱進行滅菌，為目前可靠而有效的滅菌方法。適用于耐高溫、高壓，不怕潮濕的物品，如敷料、手術器械、藥品、細菌培養基等。潛熱是指當lg100℃的水蒸汽變成lg100℃水時，釋放出2255.2J的熱量。

高壓蒸汽滅菌的關鍵問題是為熱的傳導提供良好條件，而其中最重要的是使冷空氣從滅菌器中順利排出。因為冷空氣導熱性差，阻礙蒸汽接觸欲滅菌物品，并且還可減低蒸汽分壓使之不能達到應有的溫度。

手提式高壓蒸汽滅菌器：為金屬圓筒，分為二層，隔層內盛水，有蓋，可以旋緊，加熱后產生蒸汽。鍋外有壓力表，當蒸汽壓力升高時，溫度也隨之相應升高。該滅菌器體積小，可自發蒸汽，便于攜帶。

操作方法如下：在滅菌器中盛水3000mL；將擬滅菌的物品隨同盛裝的桶放入滅菌器內；將蓋子上的排氣軟管插于鋁桶內壁的方管中；蓋好蓋子，擰緊元寶螺絲，勿使漏氣；鍋下加熱，打開排氣活門，放出冷空氣（一般在水沸后排氣10-15分鐘左右），關閉放氣活門，使壓力逐漸上升至103kPa，溫度達121.3℃，維持20分鐘后，排氣至“0”時，慢慢打開蓋子。如果突然開蓋，冷空氣大量進入，蒸汽凝成水滴，使物品潮濕，且玻璃類易發生爆裂。后再關閉放氣開關，待夾層壓力表達到滅菌所需壓力時（約10分鐘后），將蒸汽控制閥移至“消毒”位置，使蒸汽進入柜室 ，柜室內的冷空氣及冷凝水可由柜室阻氣器排出，待柜室的壓力升到103-137kPa，溫度達121.3-126.2℃時，轉動壓力調節閥，使壓力與溫度保持恒定。維持30分鐘后，將蒸汽控制閥移至“排氣”位置，排氣畢，將蒸汽控制閥移至“干燥”位置；物品干燥后，將蒸氣控制閥移至“關閉”位置，待壓力指針到“0”位置和熱空氣排盡后，才能打開柜門，取出物品；關緊進氣閥。  

臥式高壓蒸汽滅菌器：其結構原理同手提式高壓蒸汽滅菌器，因其體積大，一次可滅菌大量物品。操作人員須經專業培訓，合格后方能上崗。

預真空式高壓蒸汽滅菌器：在通入蒸汽前有一預處理階段，即柜室內抽負壓至2.6kPa（空氣排除約98％），所以，預真空高壓蒸汽滅菌器除有下排氣式所具備的滅菌系統、蒸汽輸送系統、控制系統、安全系統和儀表監測指示系統外，增加抽負壓系統和空氣過濾系統。機器運轉由電腦控制。

4．紫外線消毒

在室溫20℃~25℃時，220V、30W紫外燈下方垂直位置1.0m處的253.7nm紫外線輻射強度應70W/cm2，低于此值時應更換，適當數量的紫外燈，確保平均每立方米應不少于1.5W。紫外線消毒時，無菌室內應保持清潔干燥。在無人條件下，可采取紫外線消毒，作用時間應30min，室內濕度20%或40%、相對濕度大于60%時，應適當延長照射時間。用紫外線消毒物品表面時，應使照射表面受到紫外線的直接照射，且應達到足夠的照射劑量。人員在關閉紫外燈至少30min后方可入內作業。

5．臭氧消毒

封閉無菌室內，無人條件下，采用20mg/m3濃度的臭氧，作用時間應30min。消毒后室內臭氧濃度0.2mg/m3時方可入內作業。