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菌落總數(shù)檢測(cè)
1.為什么平板計(jì)數(shù)瓊脂需要調(diào)節(jié)pH？
2.如何保證檢測(cè)結(jié)果的有效性？
設(shè)計(jì)空白對(duì)照
實(shí)驗(yàn)環(huán)境要求
滅菌處理
樣品消毒
（2）采樣時(shí)對(duì)于易堵塞吸管的樣品（如糕點(diǎn)面包辣條等），可以放置一塊無(wú)菌紗布在放樣液的容器瓶口下方，作過(guò)濾用。
稀釋度選擇
4.為什么瓊脂凝固后需要倒置？
5.為什么培養(yǎng)基干裂？
6.菌落蔓延的原因及解決辦法？
由于大部分細(xì)菌是嗜中性的，培養(yǎng)基為符合細(xì)菌生長(zhǎng)要求，需要調(diào)節(jié)pH至7.0±0.2，盡量保證較適宜的環(huán)境，確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
（1）檢驗(yàn)過(guò)程中需要做空白對(duì)照，用來(lái)判斷培養(yǎng)基、稀釋液、平皿或吸管是否存在污染，完美的空白試驗(yàn)平板上應(yīng)該無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)。
（2）定期檢測(cè)空氣潔凈度，判斷實(shí)驗(yàn)環(huán)境是否符合標(biāo)準(zhǔn)要求。
（3）細(xì)菌檢測(cè)過(guò)程中所用到的一切用具和培養(yǎng)基都需經(jīng)過(guò)滅菌程序。
3.如何提高檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性？
（1）任何樣品在打開(kāi)包裝前，都要在取樣開(kāi)口處的周?chē)砻孢M(jìn)行消毒。
（3）不同的食品其「菌落總數(shù)」的檢出限量也不一致，通常糕點(diǎn)類(lèi)樣品中細(xì)菌量偏低，稀釋度應(yīng)選擇較小的，稀釋度可選1:10 。
糕點(diǎn)的菌落總數(shù)限量標(biāo)準(zhǔn)
平板倒置培養(yǎng)，可以減少培養(yǎng)基中水分的蒸發(fā)影響細(xì)菌生長(zhǎng)，又可以防止凝結(jié)在皿蓋上的水蒸氣流到培養(yǎng)基表面導(dǎo)致染菌出現(xiàn)菌落蔓延及難以計(jì)數(shù)。
干裂是培養(yǎng)基的水份缺失導(dǎo)致，通常2種原因：
（1）培養(yǎng)箱內(nèi)部溫度不穩(wěn)定導(dǎo)致；
（2）培養(yǎng)基倒得太薄。
菌落蔓延主要有兩個(gè)原因，一是操作不當(dāng)；二是樣品中含有變形桿菌等運(yùn)動(dòng)性強(qiáng)的細(xì)菌。
操作中需要注意3個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)：
（1）傾注培養(yǎng)基時(shí)搖晃平皿使其混合均勻，減少菌塊；
（2）樣品稀釋后，盡快傾注平板。從稀釋到傾注結(jié)束時(shí)間控制在30分鐘之內(nèi)，避免樣液干涸造成菌落成團(tuán)；平板凝固后馬上倒置；
（3）若樣品中含有變形桿菌，則可以覆蓋一層培養(yǎng)基（約4mL）。
7.異常現(xiàn)象平板如何進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)？
在完成培養(yǎng)后應(yīng)立即進(jìn)行計(jì)數(shù)，通常選取30-300CFU菌落數(shù)、無(wú)蔓延菌落生長(zhǎng)的平板作為計(jì)數(shù)，但實(shí)際操作中會(huì)出現(xiàn)各種異常現(xiàn)象。
我們通過(guò)以下表格查看：
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現(xiàn)象
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計(jì)數(shù)方式
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無(wú)任何明顯界限的鏈狀菌落
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作為一個(gè)菌落
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有幾條不同來(lái)源的鏈
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每條鏈均應(yīng)按一個(gè)菌落計(jì)算
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片狀菌落不到平板一半，而另一半又分布均勻
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半個(gè)平板的菌落數(shù)乘2代表整塊平板的菌落數(shù)
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另外，當(dāng)所有稀釋度的平板均無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)，則檢測(cè)報(bào)告應(yīng)以最低稀釋度報(bào)出，如最低稀釋度為1，則報(bào)為＜1；若最低稀釋度為1:10，則報(bào)為＜10，而不能報(bào)為「未檢出」。
