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固定的目的在于保存細(xì)胞和組織的原有形態(tài)結(jié)構(gòu)，固定劑能阻止內(nèi)源性溶酶體酶對自身組織和細(xì)胞的自溶、抑制細(xì)菌和霉菌的生長。固定液分為醛類固定液、汞類固定液、醇類固定液、氧化劑類固定液、鹽類固定液等，較為常用的是醛類中的福爾馬林、醇類中的乙醇。
4%組織細(xì)胞固定液(4% PFA，RNase free)主要由優(yōu)質(zhì)PFA、磷酸鹽、DEPC處理水組成，pH為7.4，適合于絕大多數(shù)組織和細(xì)胞的固定，尤其適用于與 RNA 有關(guān)實驗，它能較好的保護組織和細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)以及 RNA。
使用說明：
1、一般組織固定時間控制在 4～12h，大標(biāo)本應(yīng)適當(dāng)延長固定時間，培養(yǎng)細(xì)胞或細(xì)胞爬片固定時間控制在 10～15min，特殊情況除外。
注意事項：
1. 實驗過程中應(yīng)穿實驗服并戴一次性手套操作。
2. 該固定液無法高壓滅菌，所以無法做到的 RNase free，操作時請注意該細(xì)節(jié)。
3. 4%組織細(xì)胞固定液(4% PFA，RNase free)有一定刺激性和腐蝕性。一經(jīng)開啟，儲存過久固定效果易下降。
4. 避免過度延長固定時間，否則引起生物大分子過度交聯(lián)。取材厚度不同，固定時間也不同。
5. 固定液的容量應(yīng)足夠，一般固定液與組織塊的體積比率應(yīng)大于10:1。
6. 溫度對固定的影響很明顯，提高溫度可以加速固定作用，但溫度不宜過高。
7. 取出新鮮組織后，應(yīng)及時固定，無法及時固定時，應(yīng)保存于生理鹽水中及時送檢。
