凱氮 or 杜氮？誰才是蛋白質(zhì)測定的未來
發(fā)布日期：2022-08-12
核心提示：20世紀(jì)90年代之前，定氮的市場一直被凱氮統(tǒng)治著。當(dāng)然，凱氮有很大的優(yōu)勢，就是便宜。拿現(xiàn)在的采購價格，一套玻璃器皿，加上國標(biāo)中的9種試劑，成本不到1000，就可以開展實驗。尤其對于中國市場，最好不過。這么大的地域差別，使得凱氮天然具有很強(qiáng)的普適性。后來又出現(xiàn)了自動凱氏定氮儀，人工實現(xiàn)了機(jī)器操作，機(jī)器值守，解放了雙手。技術(shù)進(jìn)步至此，遇到了瓶頸。面對效率，面對實驗安全，面對并不便宜的自動凱氮，面對環(huán)保，凱氮逐漸勢微。
20世紀(jì)90年代之前，定氮的市場一直被凱氮統(tǒng)治著。當(dāng)然，凱氮有很大的優(yōu)勢，就是便宜。拿現(xiàn)在的采購價格，一套玻璃器皿，加上國標(biāo)中的9種試劑，成本不到1000，就可以開展實驗。尤其對于中國市場，最好不過。這么大的地域差別，使得凱氮天然具有很強(qiáng)的普適性。后來又出現(xiàn)了自動凱氏定氮儀，人工實現(xiàn)了機(jī)器操作，機(jī)器值守，解放了雙手。技術(shù)進(jìn)步至此，遇到了瓶頸。面對效率，面對實驗安全，面對并不便宜的自動凱氮，面對環(huán)保，凱氮逐漸勢微。實事求是講，從測試結(jié)果來看，凱氮不能回收所有的有機(jī)氮，對雜環(huán)化合物更是束手無策，比如煙酸。理論上看，會偏低。杜氮燃燒法，不管什么氮，我先燒了它，就造成無機(jī)氮也被還原成N2計算在內(nèi)，理論上看，會偏高。因此，在比較研究中，兩者的結(jié)果出現(xiàn)了差異。考慮到選擇性，干擾性、攙雜性，在分析過程中，燃燒法定氮測定的是所有的氮，對應(yīng)的是氮的總含量，而對蛋白質(zhì)缺乏選擇性。因此，該法容易受到摻假的影響。奶粉中添加三聚氰胺，就是血淋淋的教訓(xùn)。但是呢，凱氮也并不反映蛋白質(zhì)的含量，它測定的是氨基酸態(tài)的氮。所以，不同的蛋白質(zhì)序列，需要不同的校正系數(shù)。事實上看，人們把使用凱氏定氮法和杜馬斯定氮法利用系數(shù)計算出來的蛋白質(zhì)，叫粗蛋白。重點(diǎn)理解下粗，本身就是大概的值，大略的值，并不精確。因此，糾結(jié)適用凱氮還是杜氮的客戶，甭糾結(jié)了。一句話，沒有意義。換句話說，在這兩個方法測定的結(jié)果之間進(jìn)行比較，是沒有任何意義的事情，不產(chǎn)生任何學(xué)術(shù)上的，經(jīng)濟(jì)上的的任何作用。1、時間漫長。消化，蒸餾，滴定。一個樣品，半天過去了。筆者曾經(jīng)做過芝麻餅的凱氮測定，一套玻璃器皿，一天2個樣。2、危險系數(shù)。濃硫酸，高溫消化。想想都害怕。3、環(huán)保。企業(yè)都在講企業(yè)責(zé)任，追求環(huán)境友好。看看凱氮過程產(chǎn)生的廢水、廢氣，處理不好對人、對環(huán)境真的傷不起。4、價格并不便宜。稍微打探下行情，一套全自動凱氮儀器，價格真心不菲。5、人員依賴。新手，剛畢業(yè)的菜鳥，讓他們操作下，這個誤差，數(shù)據(jù)，高高低低。多說了都是淚。杜馬斯定氮呢，對應(yīng)的優(yōu)點(diǎn)非常突出：6、快速。幾分鐘內(nèi)得到結(jié)果而不是幾小時7、安全。不使用對操作人員具有危險性的化學(xué)試劑8、環(huán)保。不使用危險的、污染環(huán)境的試劑9、準(zhǔn)確度高。100% 的N回收率 („準(zhǔn)絕對“ 物質(zhì)獨(dú)立（無關(guān)）法)11、簡便。安裝簡便，不需要昂貴的基礎(chǔ)設(shè)施12、權(quán)威。在很多應(yīng)用領(lǐng)域都是標(biāo)準(zhǔn)方法
還有無數(shù)種比較的方法，比較的結(jié)果都顯示，杜氮，是必然的選擇。看看標(biāo)準(zhǔn)：GB 5009.5-2010 《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中蛋白質(zhì)的測定》第三法GB 29518-2013 《柴油發(fā)動機(jī)氮氧化物還原劑 尿素水溶液（AUS 32）》GB/T 24318-2009 《杜馬斯燃燒法測定飼料原料中總氮含量及粗蛋白質(zhì)的計算》GB/T 31578-2015 《糧油檢驗 糧食及制品中粗蛋白測定 杜馬斯燃燒法》NY/T 2007-2011 《谷類、豆類粗蛋白質(zhì)含量的測定 杜馬斯燃燒法》SN/T 2115-2008 《進(jìn)出口食品和飼料中總氮及粗蛋白的檢測方法 杜馬斯燃燒法》中國的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的適用范圍：GB/T 31578-2015《糧油檢驗 糧食及制品中粗蛋白測定 杜馬斯燃燒法》本標(biāo)準(zhǔn)適用于糧食及制品中粗蛋白測定粗蛋白含量的測定。SN/T 2115-2008《進(jìn)出口食品和飼料中總氮及粗蛋白的檢測方法 杜馬斯燃燒法》本標(biāo)準(zhǔn)適用于谷物、豆類、碾磨谷物產(chǎn)品、油籽油料、奶及奶制品、動物飼料中總氮含量和粗蛋白含量的測定。GB 5009.5-2010《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中蛋白質(zhì)的測定》第三法 適用于蛋白質(zhì)含量在10 g/100 g 以上的糧食、豆類、奶粉、米粉、蛋白質(zhì)粉等固體試樣的篩選測定。GB/T 24318-2009《杜馬斯燃燒法測定飼料原料中總氮含量及粗蛋白質(zhì)的計算 》本標(biāo)準(zhǔn)適用于單一飼料原料中總氮含量的測定和粗蛋白含量的計算。NY/T 2007-2011《谷類、豆類粗蛋白質(zhì)含量的測定 杜馬斯燃燒法》本標(biāo)準(zhǔn)適用于谷物和豆類的粗蛋白含量的測定。SN/T 2115-2008《進(jìn)出口食品和飼料中總氮及粗蛋白的檢測方法 杜馬斯燃燒法》本標(biāo)準(zhǔn)適用于谷物、豆類、碾磨谷物產(chǎn)品、油籽油料、奶及奶制品、動物飼料中總氮含量和粗蛋白含量的測定。
編輯：songjiajie2010
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