The Merrifield的固相肽合成始于1960年代, 在1980年代中期在多種平行固相合成中得到復興. Geysen 發(fā)展了一種利用多針 和標準96孔圓片一次合成96種肽的方法, Houghten 引入了茶袋法. 1990年代早期, 提出了單珠單化合物概念, 合成了一個高度混合文庫結合了子文庫和重疊合法(deconvolution). 另一方面, 被用作半導體工業(yè)中的標準方法的照相平版技術 也被應用于文庫合成.

多針法
96個聚乙烯針排列于標準96孔圓片上, 每個針的末端賦以反應用的官能團. 每個孔包含活化的氨基酸溶液, 針被浸于溶液中以進行肽偶聯(lián)反應; 每個反應孔將產(chǎn)生不同的肽產(chǎn)物. 這種方法大約能產(chǎn)生0.05-2 mmol的肽.
 微量滴定圓片多針

茶袋法
帶有小孔的聚乙烯袋, 與實際的茶袋非常相似, 里面填充樹脂珠且每個袋子置于不同的反應器皿中以完成氨基酸偶聯(lián)反應. 反應后, 收集所有的袋子一齊做去保護基反應并洗去樹脂珠以節(jié)省時間. 在本方法中, 袋子起到了濾紙的作用并防止了不同反應間樹脂珠的混和, 而且通過標記袋子, 合成的肽結構可被識別. 大約有500mmol的100種不同的肽可用此法合成, 這是平行合成的實際方法證明, 盡管合成的肽種類不是很多.

重疊合法(Deconvolution)
有幾種不同的方法可被用于重疊合法 , 一個例子如下. 如果用20種氨基酸制得5-mer的肽文庫(全部可能組合數(shù)為205 = 3,200,000), 第一個氨基酸以及其余4個都將會從20種氨基酸中隨機抽取. 在這些20套肽混合物(每個包含204 = 160,000 種肽)中, 最具活性的混合物將通過篩選而得到. 在第二輪中, 肽的1位將賦為第一輪篩選出的最具活性的, 2位將從20種氨基酸中選擇, 其余3個位置隨機選擇. 這些20肽混合物將包含203 = 8,000 種肽, 第二輪篩選將決定2位最具活性的氨基酸. 按照類似的過程, 重復3遍后找到最有活性的分子. 這種方法將使篩選100個反應(20 每輪 x 5 輪)制得的300萬余種化合物成為可能. 盡管這種方法對于液相及固相化學都可行, 因為自動化所帶來的易處使得固相肽合成及從載體上切割下來然后篩選的技術更為廣泛應用. 由于溶液中的分子是自由的, 可供選擇的篩選方式較固相載體束縛的肽更為寬泛. 雖然如此, 篩選的最初階段所給出的混合物(例如160,000)中含有太多種分子, 因而活性組分的濃度太低而不易與噪聲相區(qū)別. 一個改進的方法是固定以20種氨基酸固定一個位置并令其他4個位置隨機然后篩選; 所有的子文庫將包含160,000種肽混合物. 經(jīng)過5輪篩選, 給出最優(yōu)的選擇.

隨機合成肽混合物的一個重要方面是在一個位置上引入相同量的20種氨基酸. 如果不是這樣, 產(chǎn)生的文庫的相對量將會隨不同氨基酸的反應活性而改變, 最后干擾正常的篩選. 依靠側鏈的性質, 氨基酸的反應活性可被單獨測量, 而且一個互惠(對反應活性而言)量的氨基酸應該被混合以產(chǎn)生等量的混合物.

照相平版
照相平版術包括光敏保護基和石版印刷術, 在半導體工業(yè)中是一個標準的工具, 在平行合成中有所應用. 在這個方法中, 每個文庫化合物被放置在一枚芯片上, 而且反應歷程(因此最后的產(chǎn)品結構)將會依空間的地址識別. 隨著半導體技術的進步, 清晰度令人驚異的增加從而在一枚小芯片上提供數(shù)百乃至數(shù)千化合物. 現(xiàn)在, 芯片技術被用于肽或核苷低聚物的合成, 后者發(fā)展以至進入DNA芯片和基因芯片.
這里舉肽合成為例. 芯片的玻璃表面用化學方法修飾而產(chǎn)生用光敏基團保護的氨基. 預先設計的掩膜覆蓋到芯片上, 然后使光射到需要反應的位置上而除掉保護基從而暴露出氨基. 整個芯片置于反應釜中然后吸附氨基酸A到暴露的區(qū)域. 使用不同的掩膜, 暴露光到第二區(qū)域, 使氨基酸B在那里偶聯(lián). 如被引入的氨基酸也被光敏基團保護, 在完成第一層合成后, 上層合成可被重復以達到目標大小.

螢光標記的抗體或受體將會被加在這枚合成物質芯片表面, 然后依據(jù)鍵能, 得到螢光圖案. 讀取螢光位置的芯片地址將會識別出標記蛋白的鍵合雙方的結構. 分辨率越高, 識別螢光信號并比較強度就越需要自動化完成.