I）分析方法驗證的基本內(nèi)容

分析方法驗證的基本內(nèi)容包括方案的起草及審批，檢測儀器的確認(rèn)。

適用性驗證（包括準(zhǔn)確度試驗、精密度測定、線性范圍試驗、專屬性試驗等）和結(jié)果評價及批準(zhǔn)四個的方面。

II）分析方法驗證的基本步驟

首先是制定驗證方案，然后對大型精密儀器進(jìn)行確認(rèn)，最關(guān)鍵的一步是檢驗方法的適用性試驗，最后是檢驗方法評價及批準(zhǔn)。

1.驗證方案的制定

檢驗方法的驗證方案通常由質(zhì)量驗證小組提出。根據(jù)產(chǎn)品的工藝條件、原輔料化學(xué)結(jié)構(gòu)、中間體、分解產(chǎn)物查閱有關(guān)資料，提出規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)，確定檢查項目，規(guī)定雜質(zhì)限度，即為質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案。

根據(jù)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案確定檢查和試驗范圍，對檢驗方法擬定具體操作步驟，最后經(jīng)有關(guān)人員審批方可實施。

2.大型精密儀器的確認(rèn)

分析測試中所用的檢測儀器一般可分為三類：

A、普通儀器：崩解儀，折光儀、分析天平、酸度計、溶點測定儀、電導(dǎo)儀等；

B、較精密儀器：旋光儀、永停滴定儀、費休氏水分測定儀、 自動滴定儀、藥物溶出度儀、可見分光光度計、電泳儀等；

C、大型精密儀器：紫外分光光度計、紅外分光光度計、氣相色譜儀、高效液相色譜儀、薄層掃描儀等。

為了保證分析測試數(shù)據(jù)準(zhǔn)確可靠，每臺檢測儀器在投入正式使用之前都應(yīng)進(jìn)行確認(rèn)。

檢測儀器的確認(rèn)是檢驗方法驗證的基礎(chǔ)，應(yīng)在其它驗證試驗開始之前首先完成。

檢測儀器確認(rèn)工作內(nèi)容應(yīng)根據(jù)儀器類型。技術(shù)性能而定，通常包括：安裝確認(rèn)、校正、適用性預(yù)試驗和再確認(rèn)。

3.校正

校正是儀器確認(rèn)及檢驗方法驗證中的一個重要環(huán)節(jié)，應(yīng)當(dāng)在驗證試驗以前進(jìn)行校正。紫外分光光度計校正包括波長校正、吸收度測試、準(zhǔn)確度測試、雜散光檢查。

氣相色譜儀與高效液相色譜儀均要求做系統(tǒng)適用性試驗。在規(guī)定的色譜條件下測定色譜柱的最小理論塔板數(shù)。分離度和拖尾因子，并規(guī)定變異系數(shù)應(yīng)不大于2％。

對于化學(xué)檢驗中使用的計量儀器包括容量瓶、移液管、滴定管、分析天平亦均應(yīng)校正。

4.適用性預(yù)試驗

儀器的安裝確認(rèn)完成以后，在其功能試驗符合要求的情況下，應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)品或?qū)φ掌穼ζ溥M(jìn)行適用性檢查，以確認(rèn)儀器是否符合使用要求。

例如對熔點測定儀的適用性預(yù)試驗是采用已知溶點的甲硝唑做試驗，測試結(jié)果與已知熔點比較。

紫外分光光度計可用已知含量的某標(biāo)準(zhǔn)品試驗，測得結(jié)果與已知數(shù)值對比，確定儀器是否符合使用要求。

在完成上述各項試驗工作的同時，應(yīng)做好相應(yīng)的文件記錄等資料歸檔工作，每一臺儀器均應(yīng)有一套完整的檔案資料。

5.再確認(rèn)

為了確保儀器處于良好的使用狀態(tài)，對于一臺新購買的儀器在確認(rèn)工作結(jié)束以后，應(yīng)根據(jù)儀器的類別。確認(rèn)的經(jīng)驗制定再確認(rèn)的計劃。

再確認(rèn)的時間間隔和內(nèi)容要根據(jù)儀器類別和使用情況決定，一般是3個月、6個月或1年。

儀器再確認(rèn)的內(nèi)容通常包括線路連接、附件備品消耗檢查、清潔工作、功能試驗、工作日記等，其中重點安裝確認(rèn)中的功能試驗。

III）分析方法的適用性驗證

藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗證的目的是證明采用的方法適合于相應(yīng)的檢測要求。

在起草藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)時，分析方法需經(jīng)驗證：在藥物生產(chǎn)方法變更、制劑的組分變更、原分析方法進(jìn)行修訂時，則質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法也需進(jìn)行驗證。

方法驗證過程和結(jié)果均應(yīng)記載在藥品標(biāo)準(zhǔn)起草或修訂說明中。

根據(jù)《中國藥典》附錄XIXA的原則要求，檢驗方法的驗證可分為三種情況處理。

1.無需驗證的方法。如藥典(包括USP、EP、CP、JP等各國藥典)的方法，一般只做系統(tǒng)適用性試驗，以確認(rèn)系統(tǒng)是否符合要求(主要指儀器穩(wěn)定性及柱的分離度是否達(dá)標(biāo))。

2.對比法。已在參比實驗室驗證過的分析方法，可用對比試驗的方法來確認(rèn)方法的可靠性，即將本實驗室與參比實驗室用同一方法對同批樣品所測數(shù)據(jù)進(jìn)行比較(如至少取五個批號，每批重復(fù)測定五次)，判斷方法在本實驗室的可行性。

如有差異需查明原因或設(shè)計方案，對方法進(jìn)行再驗證。

3.需進(jìn)行系統(tǒng)驗證的方法。

IV）分析方法的評價及批準(zhǔn)

安裝確認(rèn)及適用性試驗結(jié)束后，應(yīng)將試驗數(shù)據(jù)資料進(jìn)行匯總分析。對檢驗方法作出正確的評價，驗證報告的說明及結(jié)論部分應(yīng)簡明扼要。

試驗中的主要偏差應(yīng)有適當(dāng)解釋。然后，報主管領(lǐng)導(dǎo)審批。檢驗方法驗證的最終產(chǎn)物是一個經(jīng)過驗證的方法—根據(jù)驗證的結(jié)果制訂的由有關(guān)領(lǐng)導(dǎo)批準(zhǔn)的檢驗方法。