通常來(lái)說(shuō)，潔凈室微生物污染來(lái)源和種屬概括如下：

潔凈區(qū)檢出菌的鑒別在污染調(diào)查中非常有用。新版GMP要求，需對(duì)環(huán)境及不同階段產(chǎn)品監(jiān)控的微生物進(jìn)行鑒定，并建立污染菌種庫(kù)，便于對(duì)日常監(jiān)測(cè)中出現(xiàn)異常菌株與菌種庫(kù)進(jìn)行比對(duì)，查找其來(lái)源，以便采取有效措施。

通常，潔凈區(qū)里典型的污染菌主要來(lái)自：

人體表面：革蘭氏陽(yáng)性球菌為主

環(huán)境：革蘭氏陽(yáng)性桿菌為主

各種水源：革蘭氏陰性桿菌為主的微生物

數(shù)據(jù)表明，在所有級(jí)別的潔凈區(qū)中，檢出菌類別的比例大概如下：

檢出菌的鑒定在無(wú)菌保障工藝中非常重要，可以反映出許多細(xì)節(jié)。

舉例如下：

1、當(dāng)潔凈區(qū)檢出菌庫(kù)的類別以革蘭氏陽(yáng)性球菌屬為主的情況下，大致符合上述比例，表明潔凈室繼續(xù)在正常范圍內(nèi)起作用，不必過(guò)分擔(dān)憂。

2、 潔凈區(qū)檢出菌中，皮膚相關(guān)的微生物最常見(jiàn)，微球菌屬和葡萄球菌屬占50%以上，第二個(gè)最常見(jiàn)的屬是芽孢桿菌屬約占13%。

雖然革蘭氏陽(yáng)性微生物在潔凈室中普遍存在，但其實(shí)對(duì)于葡萄球菌和微球菌屬，許多物種是人類身上固有的微生物。應(yīng)注意調(diào)查此部分微生物的被采集者，加強(qiáng)培訓(xùn)，提高人員的無(wú)菌意識(shí)，規(guī)范人員更衣程序和潔凈區(qū)行為。

3、微球菌屬中藤黃微球菌檢出率最高，它是藥物環(huán)境監(jiān)測(cè)中最常見(jiàn)的微生物之一。通常與人體皮膚有關(guān)，尤其是與頭部，手臂和腿部有關(guān)。無(wú)菌技術(shù)的缺陷以及潔凈室管理不善是藤黃微球菌污染的常見(jiàn)原因。

4、芽孢桿菌屬中蠟狀芽孢桿菌檢出率最高，蠟狀芽孢桿菌的孢子通常被確定為最難消毒和根除的。根據(jù)檢出地點(diǎn)，應(yīng)引起足夠重視。

5、丙酸桿菌和棒狀菌毋庸置疑來(lái)自于人體。但當(dāng)某短時(shí)間在高級(jí)別潔凈室中頻繁檢出如人表皮葡萄球菌屬、丙酸桿菌屬等來(lái)自于人體的微生物，應(yīng)注意生產(chǎn)過(guò)程中，規(guī)范人員更衣程序和潔凈區(qū)行為�；蛘咴u(píng)估所穿潔凈服的過(guò)濾能力，潔凈服由于反復(fù)滅菌使用，并無(wú)法保證所有重復(fù)使用的潔凈服都具有相同的過(guò)濾性能。

6、革蘭氏陽(yáng)性桿出現(xiàn)在物體表面的頻率更高。與A、B級(jí)潔凈區(qū)相比，C、D級(jí)潔凈室中，革蘭氏陽(yáng)性桿的數(shù)量相對(duì)較高。這符合正常現(xiàn)象，因?yàn)槲锲愤M(jìn)入低級(jí)潔凈室的清潔消毒程序往往較不嚴(yán)格。

7、 潔凈區(qū)中革蘭氏陰性桿菌和真菌的檢出率較低。但意味更深遠(yuǎn)。應(yīng)引起特別重視。

8、 潔凈區(qū)中革蘭氏陰性桿菌的比例指示水源污染程度。在D級(jí)潔凈室中， 革蘭氏陰性桿菌占分離物的比例要大得多。這也反映了在這些地區(qū)水槽（水源）較多。

若在A、B級(jí)潔凈室中革蘭氏陰性桿菌的比例較高，應(yīng)引起重視。可能與潔凈室濕度設(shè)置過(guò)高有關(guān)，或部分水漬未及時(shí)清理擦干，也存在制藥用水過(guò)濾除菌不夠徹底的可能。企業(yè)可以實(shí)行無(wú)水化管理。

9、 在檢出菌的鑒別中，葡萄球菌的不同種屬的鑒定可能挖掘不出太多有用的信息；但在B級(jí)潔凈室中鑒別到假單胞菌樣則意味著很多，務(wù)必需要擴(kuò)大調(diào)查。

10、絕大多數(shù)來(lái)自潔凈區(qū)的細(xì)菌是中溫好氧或兼性需氧菌。但在使用特殊氣體，有時(shí)與冷凍干燥機(jī)相關(guān)聯(lián)的情況下，部分細(xì)菌可在厭氧條件下生長(zhǎng)和被發(fā)現(xiàn)。

如痤瘡丙酸桿菌可能在凍干制品中被發(fā)現(xiàn)，因?yàn)楸揪鸀閰捬趸蚣嫘詤捬�，是無(wú)菌灌封中令人頭痛的一個(gè)微生物《2010GMP實(shí)施指南：無(wú)菌制劑》，根據(jù)經(jīng)驗(yàn)，該微生物直到在培養(yǎng)基中培養(yǎng)12 天后才能生長(zhǎng)到肉眼可以觀察的濃度。

11、 芽孢污染是制藥企業(yè)車間較為嚴(yán)重的污染之一，應(yīng)注意每月交替更換消毒劑，使用殺孢子劑定期殺滅芽孢。

12、潔凈區(qū)中真菌的檢出率也很低。如果真菌的發(fā)生率較高，鑒于真菌的生長(zhǎng)特性，反映了一些潔凈室的濕度較高或者通風(fēng)不良。

特別每年梅雨季節(jié)時(shí)，空氣濕度大，真菌可能快速生長(zhǎng)繁殖，如果物品傳遞、脫包消毒程序不夠完善，未經(jīng)處理的外氣流流入或者物品和人員可能攜帶微生物帶入潔凈區(qū)。

潔凈室一旦有大量真菌污染，采用紫外消毒或消毒液不易殺滅，以致無(wú)菌保障水平得到嚴(yán)重破壞，應(yīng)當(dāng)重視潔凈區(qū)真菌污染。

13、無(wú)菌測(cè)試結(jié)果為陽(yáng)性時(shí)，檢出菌應(yīng)當(dāng)鑒定到種。應(yīng)當(dāng)回顧微生物監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)，確認(rèn)污染源自測(cè)試中所使用的物料或技術(shù)的差錯(cuò)，可判該測(cè)試無(wú)效，否則判該批次不符合要求，應(yīng)調(diào)查生產(chǎn)或?qū)嶒?yàn)室存在問(wèn)題，并深入全面地調(diào)查整個(gè)生產(chǎn)工藝。

最后，潔凈區(qū)檢出菌所反應(yīng)出的信息遠(yuǎn)不止上述內(nèi)容，我們目前還只是管中窺豹。無(wú)菌保障工藝中關(guān)鍵的方面，是將污染數(shù)據(jù)與污染控制措施相關(guān)聯(lián)。重點(diǎn)分析微生物趨勢(shì)并采取相應(yīng)措施。

通過(guò)檢出菌鑒別盡可能找到污染源，消除或減少污染源頭的風(fēng)險(xiǎn)比依靠空氣過(guò)濾或清潔程序更有意義。